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Protéine A, la protéine G et la Protéine L

Purification d'anticorps à l'aide de protéines se liant aux anticorps

La Protéine A, la protéine G et la Protéine L sont des protéines natives et recombinantes d'origine microbienne qui se lient aux immunoglobulines de mammifères (Ig). La protéine A et la protéine G se lient avec haute affinité et haute spécificité à la région Fc d'immunoglobulines de diverses espèces de mammifères, et notamment les IgG. La protéine L se lie aux immunoglobulines via la chaîne légère kappa. Ces protéines qui se lient aux anticorps peuvent être utilisées pour purifier, immobiliser ou détecter des immunoglobulines. Ces protéines (la protéine A, la protéine G et la protéine L) sont typiquement fixées sur un support solide tel que des billes de sépharose ou des billes magnétiques. Le Tableau 1 résume les différents formats disponibles pour les protéines se liant aux anticorps.

Tableau 1. Formats disponibles pour les protéines se liant aux anticorps

Antibody-binding protein Sepharose beads Magnetic beads Sepharose column
Protein A ABIN412439 ABIN400575 ABIN412448
Protein G ABIN412450 ABIN400576 ABIN412455
Protein L ABIN412460 ABIN412464 ABIN629427
Protein A / G ABIN412443 ABIN400577 ABIN629425
Protein A / G / L ABIN412465 ABIN412469 ABIN629429

Les immunoglobulines (Ig) de mammifère peuvent être purifiées à partir de milieux de cultures cellulaires, d'ascites et d'échantillons sériques. Ces billes fixant des anticorps liés aux protéines constituent une méthode pratique et à rendement élevé pour obtenir des anticorps monoclonaux et polyclonaux hautement purifiés à partir de divers échantillons biologiques. Naturellement, la spécificité et l'affinité de liaison de ces protéines varie selon l'espèce source et la sous-classe d'anticorps. Le Tableau 2 résume la spécificité de liaison aux anticorps de chaque protéine qui se lie aux anticorps d'origine humaine, de souris et de rat.


Tableau 2. Affinité de liaison aux immunoglobulines pour les protéines A / G / L

Species Immunoglobulin Protein A Protein G Protein L
H IgG (normal) ++++ ++++ ++++
H IgG1 ++++ ++++ ++++
H IgG2 ++++ ++++ ++++
H IgG3 - ++++ ++++
H IgG4 ++++ ++++ ++++
H IgM - - ++++
H IgA - - ++++
H IgE - - ++++
H IgD - - ++++
H Fab ++ ++ ++++
M IgG1 + ++++ ++++
M IgG2a ++++ ++++ ++++
M IgG2b +++ ++++ ++++
M IgG3 ++ +++ ++++
R IgG1 - + ++++
R IgG2a - ++++ ++++
R IgG2b - ++ ++++
R IgG2c + ++ ++++
Note: H = human, M = mouse, R = rat