ModDetect® Panels
Les panels ModDetect® de Rockland sont des réactifs prêts à l’emploi, basés sur des immunoessais, conçus pour détecter des modifications chimiques spécifiques dans les oligonucléotides thérapeutiques, indépendamment de la séquence ou de la position de la modification. antibodies-online est fier de proposer les panels ModDetect® dans le monde entier, offrant aux chercheurs internationaux un accès direct à ces produits avec le soutien d’un partenaire de distribution européen de confiance.
Que sont les panels ModDetect® ?
Les panels ModDetect® comprennent des réactifs d’anticorps monoclonaux dirigés contre des modifications chimiques spécifiques présentes dans les oligonucléotides thérapeutiques, notamment les liaisons phosphorothioates (PS) du squelette et les modifications du sucre en position 2′ telles que le 2′-O-méthoxyéthyl (2′-MOE) et le 2′-O-méthyl (2′-OMe). Comme ces anticorps reconnaissent la modification chimique elle-même plutôt que la séquence d’acide nucléique, ils peuvent être appliqués à divers candidats oligonucléotidiques, tels que les ASO, les siRNA, les ARNm et les aptamères, sans nécessiter le développement de sondes spécifiques à la séquence.
Formats de panels disponibles :
- Non conjugué : pour les workflows standards d’immunofluorescence, d’IHC et d’ELISA
- Biotinylé : pour les ELISA sandwich, les essais de capture basés sur la streptavidine et d’autres formats médiés par la biotine
Les deux formats sont compatibles avec les plateformes d’immunoessais établies, notamment ELISA, immunocytochemie (ICC) et immunohistochimie (IHC), ce qui facilite l’intégration des panels ModDetect® dans les workflows précliniques existants.
Données de performance ModDetect
Localisation intracellulaire des ASO modifiés par PS
Les réactifs du panel ModDetect PS permettent une visualisation claire des ASO modifiés par phosphorothioate à l’intérieur des cellules. En utilisant le clone PS05, une coloration cytoplasmique ponctuée, compatible avec une accumulation endosomale, a été observée dans des cellules de gliome murin traitées par oligonucléotide, sans signal dans les contrôles traités uniquement avec le véhicule. Ces données illustrent comment les anticorps ModDetect soutiennent l’évaluation de l’absorption cellulaire et du trafic intracellulaire sans nécessiter de sondes marquées ou spécifiques à la séquence.
Figure 1. Immunofluorescence utilisant le réactif ModDetect PS05 dans des cellules de gliome murin traitées avec un oligonucléotide thérapeutique modifié par PS. Alpha-tubuline (rouge) ; PS05 (vert). PS05 utilisé à une dilution de 1:2 000. La coloration cytoplasmique ponctuée est compatible avec un stockage endosomal.Détection combinée des modifications PS et 2′-MOE in vivo
De nombreux oligonucléotides thérapeutiques incorporent plus d’une modification chimique, et les panels ModDetect sont conçus pour prendre en charge cette complexité. Les anticorps Anti-PS (clone PS03) et Anti-MOE (clone MOE4) ont été utilisés ensemble pour détecter un gapmer ASO 5-10-5 modifié par 2′-MOE après administration sous-cutanée chez la souris. Les deux anticorps ont produit une coloration forte et spécifique, cohérente avec la biodistribution attendue de l’ASO doublement modifié, confirmant que les réactifs ModDetect issus de différents panels peuvent être utilisés en combinaison au sein d’un même workflow.
Figure 2. Détection par immunofluorescence double d’un gapmer ASO doublement modifié PS/2′-MOE dans un tissu de souris après administration sous-cutanée (50 mg/kg, 72 h). Les clones Anti-PS PS03 et Anti-MOE MOE4 ont été appliqués en combinaison.Distribution cytoplasmique de siRNA modifié par 2′-OMe dans des cellules hépatiques
Les réactifs du panel ModDetect 2′-OMe prennent en charge la détection d’oligonucléotides modifiés par OMe dans des modèles cellulaires physiologiquement pertinents. Dans des cellules HepG2 d’hépatoblastome humain, le siRNA lumasiran a été détecté à l’aide du clone OME3, avec une coloration cytoplasmique ponctuée compatible avec un piégeage endosomal. La co-coloration avec la phalloïdine et le DAPI a fourni un contexte structurel par rapport au cytosquelette d’actine et aux noyaux, soutenant une interprétation fiable des profils de distribution intracellulaire.
Figure 3. Détection par immunofluorescence du siRNA lumasiran dans des cellules HepG2 à l’aide du clone ModDetect Anti-2′-OMe OME3. Co-coloration avec la phalloïdine (cytosquelette) et le DAPI (noyaux).Panels ModDetect® disponibles
Panel ModDetect® Phosphorothioate
ABIN7675637
Panel biotinylé ModDetect® Phosphorothioate
ABIN7675638
Panel ModDetect® 2'-O-Methyl (2'OMe)
ABIN7675641
Panel ModDetect® 2-Methoxyethyl (2'MOE)
ABIN7675639
Panel biotinylé ModDetect® 2-Methoxyethyl (2'MOE)
ABIN7675640
Complétez votre workflow ModDetect avec des marqueurs subcellulaires
La co-coloration des anticorps ModDetect® avec des marqueurs subcellulaires spécifiques de compartiments renforce l’interprétation des données en fournissant un contexte structurel aux résultats de localisation. Des marqueurs endosomaux, lysosomaux, cytosquelettiques et nucléaires sont disponibles via antibodies-online et ont été utilisés avec les réactifs ModDetect® dans des workflows d’ICC et d’immunofluorescence afin de confirmer la distribution intracellulaire, d’évaluer le trafic intracellulaire et de soutenir des données d’imagerie prêtes pour publication.
Produits et ressources associés
- Discover All Moddetect® Panels
- Télécharger l’article méthodologique - Méthodes d’analyse des médicaments oligonucléotidiques
- Subcellular Markers
