Kits ELISA en compétition
ELISA compétitifs pour la quantification de petites molécules, peptides et hormones dans une grande variété de types d’échantillons. Dans un ELISA compétitif, l’intensité du signal est inversement proportionnelle à la concentration en antigène : plus la concentration de l’analyte est élevée, plus le signal est faible.
Le principe repose sur une compétition entre l’antigène présent dans l’échantillon et l’antigène immobilisé sur la plaque pour une quantité limitée d’anticorps. Un anticorps primaire (non marqué) est d’abord incubé avec l’échantillon. Ce mélange est ensuite ajouté dans des puits préalablement recouverts du même antigène. Plus la quantité d’antigène dans l’échantillon est élevée, moins il reste d’anticorps disponibles pour se lier à la plaque.
Après lavage, un anticorps secondaire conjugué à une enzyme est ajouté, suivi de l’ajout du substrat. Le signal chromogénique ou fluorescent obtenu diminue lorsque la concentration en antigène augmente.
Les ELISA compétitifs sont particulièrement utiles lorsqu’aucune paire d’anticorps adaptée n’est disponible ou lorsque l’analyte est trop petit pour permettre la fixation simultanée d’un anticorps de capture et d’un anticorps de détection. Ils sont donc privilégiés pour les petites molécules, peptides et certaines hormones.
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